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——《山东医药》
作者
殷玉1,王亚红1,许志亮2,刘刚1
1医院呼吸内科,;2医院临床研究中心
摘要
目的观察miR--3p对非小细胞肺癌(NSCLC)细胞迁移与侵袭能力的影响。
方法收集发生和未发生淋巴结转移的NSCLC组织样本各26、21例份,常规培养人NSCLC细胞株A及高转移性NSCLC细胞株H,采用实时荧光定量PCR法检测不同组织及细胞中miR--3p相对表达量。将对数生长期的H细胞分为对照组、miR--3pmimics组、miR--3pinhibitor组,分别使用Lipofectamine转染试剂盒转染对照miRNA、miR-3pmimics、miR--3pinhibitor。转染30h,采用Transwell法检测细胞迁移和侵袭能力(以迁移和侵袭细胞数表示),采用Westernblotting法检测迁移标志物E-钙黏蛋白(E-cadherin)、波形蛋白(Vimentin)及侵袭标志物基质金属蛋白酶9(MMP-9)、基质金属蛋白酶3(MMP-3)蛋白表达。
结果发生和未发生淋巴结转移的NSCLC组织miR--3p相对表达量分别为1.±0.、0.±0.,二者比较P0.01。A、H细胞miR--3p相对表达量分别为1.02±0.、31.45±1.,二者比较P0.01。miR--3pinhibitor组、对照组、miR--3pmimics组迁移细胞数、侵袭细胞数及Vimentin、MMP-9、MMP-3蛋白相对表达量均依次升高,E-cadherin蛋白相对表达量依次降低,两组间比较P均0.05。
结论miR--3p可能通过升高Vimentin、MMP-9、MMP-3蛋白表达及降低E-cadherin蛋白表达而促进NSCLC细胞的迁移和侵袭。
关键词:非小细胞肺癌;miR--3p;迁移;侵袭;E-cadherin;Vimentin;MMP-9;MMP-3
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